皮膚變态反應試驗

原理：

抗原物質作用于機體後(hòu)可緻使機體的反應性發(fā)生改變。當機體再次暴露于相同抗原時(shí)，所産生的反資源美麗應與首次不同，或出現對(duì)機體有利的免疫反應，或出現對(duì)機體組織有損傷的變态反應。變态反應亦TVTV稱為超敏反應（hypersensitivity）或過(guò)敏反應（anaphylaxis）。

試驗目的：

确定重複接觸化妝品及其原料對(duì)哺乳動物是否可引起(qǐ)變态反應及其程度。

實驗動物通過(guò)多次皮膚塗抹（誘導接觸）或皮内注射受試物 10d—14d（誘導階段）後(hòu)，給予激發(fā)劑量的受試物，觀察實驗動物并與對(duì資源美麗)照動物比較對(duì)激發(fā)接觸受試物的皮膚反應強度。試驗方法包括局部封閉塗皮試驗（Buehler Test, BT），豚鼠最大值試驗 (Guinea Pig Maxim高清動漫inatim Test , GPMT)

預測模型：

緻敏強度分級标準

注：緻敏率為0%時(shí)，可判為未見皮膚變态反應。

*試驗結果應能(néng)得出受試物的緻敏能(néng)力和強度。這(zhè)些結成全丁香花果隻能(néng)在很有限的範圍内外推到(dào)人類。引起(qǐ)豚鼠強烈反應的物質高清版資源在人群中也可能(néng)引起(qǐ)一定程度的變态反應，而引起(qǐ)豚鼠較弱反應的物質在人群成全國語中也許不能(néng)引起(qǐ)變态反應。

體外-keratinosens

基本原理：

本方法參考OECD TG 442D <In Vitro Skin Sensitisatio視頻資源n Assays Addressing The AOP Key Event On keratinicyte 動漫資源Activation，Appendix IA: In Vitro Skin Sensitisation: The A藝術美麗RE-Nrf2 Luciferase KeratinoSens^TM Test Method>。KeratinoSens^TM是一個基于轉染了選擇性質粒的HaCaT角質細胞作為檢測系統的方法。通過(guò)定量檢測由Keap1-Nrf2-ARE反應通路激活引起(qǐ)的熒光素酶基因表達情況，作為皮膚緻敏的反應量化指标。

目的：該試驗的目的是有助于評估化學(xué)品的皮膚緻敏潛力。在角質形成(chéng)細胞中誘導細胞保護途徑以應對(duGO在線ì)親電性和氧化應激是解決皮膚緻敏化不良結果途徑的第二個關鍵事(shì)件(AOP)。

基本步驟：

KeratinoSens細胞接種(zhǒng)于96孔闆，維持培養24h，形成(chéng)半彙合單層。然後(hòu)將(jiāng)樣(yàng)品系列濃度暴露于細胞好姑娘TV48小時(shí)後(hòu)，進(jìn)行熒光素酶誘導和細胞毒性測定。計算細胞活率和誘美麗好姑娘導倍數FI、EC1.5值。

預測模型：

以下情況滿足四項即可認為該受試物為陽性結果，否則可考慮為陰性：

1）Imax大于1.5，并且與溶劑對(duì)照（陰性對(duì)照DMSO）比較具有統計學(xué)意義；

2）産生大于1.5倍熒光活性的最低濃度情況下，細胞活率大于70%；

3）EC1.5小于1000μM（或者相對(duì)沒(méi)有相對(duì)分子質量藝術高清的物質，小于200μg/mL）；

4）存在十分明顯的劑量反應關系。

體外 h-calt

基本原理：

本方法參考OECD TG 442E <IN VITRO SKIN SENSITISA資源高清TION ASSAYS ADDRESSING THE KEY EVENT ON ACTIVATION OF D飄雪TVENDRITIC CELLS ON THE ADVERSE OUTCOME PATHWAY FOR SKIN SENS資源高清版ITISATION>，OECD TG 442E（2018）In Vitro Skin Sensitisation Assays Addressi免費美麗ng The Key Event On Activation Of Dendritic CMV在線ells On The Adverse Outcome Pathway For Skin Sensit美麗姑娘isation - Annex I: In Vitro Skin Sensitisa在線在線tion: Human Cell LineActivation Test (H-CLAT)在暴露于受試物24小時(shí)後(hòu)，定量測定人單核細胞白血病細胞系THP-1細胞表面(miàn)标志物表達（即CD86和CD54）的變化。

h-CLAT方法量化了人單核細胞白血病細胞系THP-1暴露于緻敏劑後(hòu)，與單核細胞和樹突狀細胞(DC)(即CD86和CD54)激活過(guò)程相關的細胞表面(miàn)标記物的表達變化。然後(hòu)，測量TVMV的CD86和CD54細胞表面(miàn)标記物的表達水平被(bèi)用于支持皮膚緻敏劑和非緻敏劑之間的區大地高清版分。

目的：通過(guò)細胞表面(miàn)特征标志物CD54和CD86的改變可對(duì)物質潛在的緻敏性進(jì美麗視頻n)行預測。

基本步驟：

數據分析：

對(duì)于CD86/CD54 表達測量，每種(zhǒng)測試化學(xué)品至少在兩(liǎng)次獨立運行中姑娘直播進(jìn)行測試，以得出單一預測（陽性或陰性）。如果在2 次中的2 次或3 次獨立運行中的至少2 次中至少滿足以下條件之一，則h-CLAT 預測被(bèi)認為是陽性的，否則h-CLAT 預測被(bèi)認為是陰性的：

RFI CD86在至少一種(zhǒng)測試濃度（細胞活力≥50%）中等于或大于150%；

RFI CD54在至少一種(zhǒng)測試濃度（細胞活力≥50%）中等于或大于200%。